紫外-可見分光光度計作原理結(jié)構(gòu)與能
作原理
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比；如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液行定量分析。
結(jié)構(gòu)與能
由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示系統(tǒng)五大分組成。
光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區(qū)，般為鎢燈和鹵鎢燈，波長范圍是350~1000nm；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，般為氫燈和氘燈，連續(xù)波長范圍是180~360nm。
單色器：能是將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計的心臟分。
吸收池：又稱比色皿，供盛放試液行吸光度測量之用，其底及兩側(cè)為毛玻璃，另兩面為光學(xué)透光面，為減少光的反射損失，吸收池的光學(xué)面須垂直于光束方向。根據(jù)材質(zhì)可分為玻璃池和石英池兩種，前者用于可見光光區(qū)測定，后者用于紫外光區(qū)。
檢測器：是將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置，測量吸光度時，并非直接測量透過吸收池的光強度，而是將光強度轉(zhuǎn)換為電流信號行測試，這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測器。